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실험레포트

[생공실1] 예비레포트 Recombinant protein expression in Escherichia coli

by jia23 2023. 1. 23.

 

예비레포트 Recombinant protein expression in Escherichia coli

Plasmid의 특징과 plasmid를 이용한 genetic engineering에 대해 알아본다
Plasmid는 세균의 염색체 이외의 독자적으로 증식할 수 있는 DNA분자라는 의미로 명명되었다. Plasmid는 생장에 필수적인 염색체 DNA에서 물리적으로 분리되어 있는 대표적인 에피솜 DNA 분자이며 대개 원형의 이중가닥 DNA로 구성되어 있으며 독립적으로 분열할 수 있는 능력을 가지고 있다. 이러한 이유 때문에 플라스미드는 재조합DNA기술에서 클로닝에 가장 많이 사용되는 벡터이다.
 
Plasmid는 크게 접합성 플라스미드와 비접합성 플라스미드로 분류할 수 있다.
접합성 플라스미드는 유전물질의 이동을 돕는 tra유전자를 가지고 있기 때문에 박테리아 사이에 접합을 통하여 플라스미드의 이동을 자유롭게 하는 반면에,
비접합성 플라스미드는 접합할 수 있는 능력이 없어 접합성 플라스미드의 도움을 받아야 다른 박테리아로 이동할 수 있다.
 
플라스미드는 기능에 따라서 F-플라스미드, R-플라스미드, Col플라스미드, 분해플라스미드, 독성 플라스미드로 분류할수 있다.
F-플라스미드는 tra 유전자를 가지고 있어 박테리아에게 접합할 수 있는 능력을 준다. 그리고  R-플라스미드는 박테리아에게 항생제나 독소에 저항성(resistance)를 부여하며, R-플라스미드에는 항생제를 분해할 수 있는 효소를 만드는 유전자가 있다. 또 다른 Col 플라스미드는 다른 박테리아를 죽일 수 있는 독소인 박테리오신(bacteriocin)의 한 종류인 콜리신(colicin)을 만드는 유전자를 가지고 있다. 또한 분해 플라스미드는 박테리아에 톨루엔과 같은 물질을 분해할 수 있는 능력을 제공하며 유해물질을 제거하는데 사용될 수 있다.  마지막으로 독성 플라스미드 박테리아를 병원성이 나타나도록 만든다.
 
플라스미드에는 약제에 대한 저항성을 가진 내성인자(R인자), 세균의 자웅을 결정하는 성결정인자(F인자) 등이 발견되고 있다. 세균의 생존에 플라스미드의 존재가 필수적인 것이 아니며, 또 플라스미드는 다른 종의 세포 내에도 전달된다. 이러한 특성을 이용하여 플라스미드는 유전공학에 폭넓게 이용되고 있다.
대표적인 기술로 유전자재조합 기술이 있는데, 세균 내 플라스미드를 세포 밖으로 빼내고 제한효소로 끊은 뒤, 필요로 하는 유전자를 삽입하여 이를 다시 세균에 넣어 배양하는 기술이다.
 
 대장균의 플라스미드에는 F인자, R인자, 콜리신(colicin) 인자 등이 알려져 있다.
Reference 강영희, 「생명과학대사전」, 아카데미서적, 2008
사이언스올 과학백과사전, “플라스미드
두산백과doopedia, “플라스미드
미생물학백화, “플라스미드

 

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