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생공실5

[생공실1] 결과레포트 Recombinant protein overexpression in E. coli strains, Protein purification(Affinity chromatography) 목차 1. Title 2. Materials & Methods 3. Result 4. Discussion 5. Reference 1. Title Recombinant protein overexpression in E.coli strains, Protein purification(Affinity chromatography) 2. Materials & Methods - Recombinant protein overexpression in E.coli strains IPTG, Lysis buffer, LB broth, 50ml tube, 1L 삼각 플라스크, 에이드 1. Recombinant plasmid를 BL21(DE3) strain에 transformation 시킨다. 2. Transformation된 B.. 2023. 1. 29.
[생공실1] 예비레포트 Protein purification (Affinity chromatography) 목차 1. Title 2. Purpose 3. Introduction 4. Reference 1. Title Protein purification (Affinity chromatography) 2. Purpose affinity chromatography에 대해, His purification에 대해, 그리고 protein induction 조건과 protein의 solubility에 대해 알아본다. 3. Introduction 크로마토그래피라는 용어는 혼합물의 구성요소를 두 상 사이의 분할에 기초하여 분리하는 분석 및 전처리기술에서 널리 사용된다. 고체 매트릭스가 정지상으로, 단백질을 분질할 때에는 보통 기체보다 액체가 이동상으로 사용되어 크로마토그래피를 통과하여 흐른다. 칼럼 크로마토그래피에서 칼럼은.. 2023. 1. 28.
[생공실1] 예비레포트 Recombinant protein overexpression in E. Coli strains 목차 1. Title 2. Purpose 3. Introduction 4. Reference 1. Title Recombinant protein overexpression in E.Coli strains 2. Purpose protein expression에 사용되는 유전자 변형 대장균인 strain인 BL21(DE3) E.coli와 BL21(DE3) pLysS E.coli, BL21(DE3)soluble E.coli stain에 대해 알아본다. 3. Introduction 단백질 발현에 사용되는 균주로는 BL21(DE3)이 있다. 외부 단백질 발현에 사용되는 가장 대표적인 균주로써 ompT protease가 없어서, 생성되는 단백질에 큰 영향을 미치지 않는 장점을 지니고 있다. BL21중에서도 T7 R.. 2023. 1. 27.
[생공실1] 결과레포트 Immunoblotting Analysis (Western blot) 목차 1. Tilte 2. Materials & methods 3. Result 4. Discussion 5. Reference 1. Tilte :Immunoblotting Analysis (Western blot) 2. Materials & methods Materials Protein sample, 5X SDS Loading dye, Protein marker, GEL, SDS running buffer, Methanol, Transfer membrane, blotting paper, sponge, Transfer Buffer, ECL solution (luminol이 포함된 substrate), 필름지, skim milk power, TBST용액, primary antibody, Secondary .. 2023. 1. 26.

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